大食蚁兽领地活动面积可能高达9,000公顷。沟通与知觉及大多数交流方式发生在幼仔和它们的母亲之间,也包括只是短暂地聚在一起进行的求偶和争斗。这些包括打斗、嗅探、嘶嘶声,以及打架时的咆哮声。视力和听力不佳。嗅觉高度发达,是人类的40倍。大食蚁兽在地面活动,除了一对年轻的母子对,通常独居。昼伏夜出。性情温和,对人畜无害。如果遇到危险,大食蚁兽就疾走逃遁,动作十分难看。若实在逃不脱时,它就用尾巴坐在地上,竖起前半身,用前足坚强有力的钩爪进行反击,同时口中还会发出一种奇特的哨声威胁敌害。
当大食蚁兽在野外相遇时,它们常常会相互无视或逃跑,尽管也会发生激烈的打斗。通常,大食蚁兽会在昼夜出现,在人类高密度地区或某些天气条件下会夜间活动。它们是陆生动物,大食蚁兽在日间和夜间都会活动,根据不同环境而调整。它们是陆生动物,也是游泳健将,它们可以游过宽敞的河流,也会在水中洗澡。大食蚁兽的尾巴不但能在睡觉时包裹自己保持热量,也有助于睡觉时伪装自己。不经常在野外攀登,但据报道它们擅长从圈养圈中攀登。睡眠选择在废弃的洞穴、茂密的植被或地面的凹陷处。尽管它们有很好的挖掘能力,但自己却没有建造洞穴。当发生搏斗时,通常会以尾巴平衡和前肢进行搏击,从而站成两足动物的姿势。它们在行走时会打乱步伐并缓慢移动,但在必要时能够快速运行。它们用指关节和腕部承重,以保护爪子。
大食蚁兽基本上以蚁类为食,它们没有牙齿,有一个很长的嘴,当长嘴前端的鼻子嗅出白蚁的气味以后,便启动锋利的前爪刨开蚁堡和树干,直捣白蚁窝,趁白蚁惊慌逃窜时,它便伸出长约30厘米的舌头,利用舌上的黏液粘住白蚁,送进嘴里,囫囵吞食。它们用舌头收集卵、幼虫和成虫。 进食过程中唾液腺分泌粘稠的唾液,使舌头变薄。 它们只在一个蚁群中停留很短的时间,因为要避开很快就会到达的善战的兵蚁。
大食蚁兽用嗅觉来寻找蚁穴,在各蚁穴平均花1分钟觅食,每天会造访200个蚁巢,同时一天可以摄食30,000只蚁。和鸟类一样,大食蚁兽也会摄食沙粒会帮助消化。由于大食蚁兽无法分泌胃酸,因而它们需要及时补充蚁酸去消化食物。它们的舌头附着在胸骨上,移动非常迅速,每分钟轻弹150次。偶尔可能会吃水果。
大食蚁兽可以用其巨大的前爪来保护自己免受掠食者的侵害,尽管它们对威胁的典型反应是逃跑。 它们的大小使它们几乎不受除掠食者——美洲虎和美洲狮以外的所有动物的侵害。但经常被人类杀死,在人类有意地狩猎或与无意中与汽车相撞而被杀死。大食蚁兽目前被IUCN红色名录列为“易危(Vulnerable) ”物种,也被CITES公约列为附录II物种。大食蚁兽所面临的威胁有栖息地破坏、火灾以及为毛皮和野味为目的盗猎。